RÉSUMÉ
La stratégie diagnostique des maladies plaquettaires constitutionnelles nécessite des techniques très performantes qui ne sont disponibles que dans les laboratoires d’hémostase spécialisés. Malheureusement, ces plateaux techniques ne sont pas disponibles dans les laboratoires des pays en voie de développement. Cette situation rend le diagnostic des maladies plaquettaires constitutionnelles très difficile voire impossible dans ces régions. Nous discutons dans ce texte d’une méthode diagnostique des maladies plaquettaires constitutionnelles accessible aux pays en voie de développement. L’immunofluorescence sur lame consiste en la mise en évidence par immunomarquage sur frottis sanguins d’anomalies de la répartition ou de l’expression de protéines plaquettaires grâce à l’utilisation d’un ou plusieurs anticorps monoclonaux ou polyclonaux spécifiques préalablement rendus fluorescents par couplage à un fluorochrome. La phase préanalytique d’excellente qualité permet l’étalement de 10 à 20 frottis sanguins sur des lames bien dégraissées à partir du sang anticoagulé par l’EDTA ou du sang capillaire. Le choix du panel d’antigènes à tester dépendra des antécédents personnels et familiaux des patients, de la taille des plaquettes sanguines, et de la morphologie des autres éléments cellulaires. Des témoins positif et négatif sont idéalement nécessaires pour la validation technique des résultats de l’immunofluorescence sur lame. Même si cette technique nécessite un centre spécialisé et un personnel qualifié, elle permet, grâce à la confrontation bioclinique, l’identification avec de très bonnes performances des thrombopathies comme la maladie de Glanzmann et celle de Bernard-Soulier et certaines thrombopénies constitutionnelles comme le syndrome MYH9.
MOTS CLÉS
immunofluorescence sur lame, maladies plaquettaires constitutionnelles, pays en voie de développement
ABSTRACT
The diagnostic strategy of inherited platelet disorders requires very powerful techniques, which are only available in specialized hemostasis laboratories. Unfortunately, this technical platform is usually not available in the laboratories of developing countries. This makes the diagnosis of constitutional platelet diseases almost impossible in these regions. In this paper, we discuss a diagnostic method for constitutional platelet diseases accessible to developing countries. Immunofluorescence on slide consists in the detection of abnormalities in the expression/distribution of platelet proteins by immunostaining on blood smears using one or more specific monoclonal or polyclonal antibodies, which have been previously made fluorescent by coupling to a fluorochrome. The pre-analytical phase is critical and implicates the preparation of 10 to 20 blood smears from EDTA-anticoagulated blood or capillary blood on clean and well-degreased slides. The choice of antigen panel to be tested will depend on the personal and family history of the patients, the size and morphology of platelets, and the morphology of other blood cells. Positive and negative controls are mandatory for the technical validation of the immunofluorescence slides results. Even if this technique requires a specialized center and qualified personnel, it allows, thanks to the bioclinical comparison, the identification with very good performances of thrombopathies such as Glanzmann’s disease and Bernard-Soulier’s disease and of some congenital thrombocytopenias such as the MYH9 syndrome.
KEYWORDS
blood smear, developing countries, immunofluorescence, inherited platelet disorders
