Ce texte constitue une mise à jour des propositions relatives à la réalisation pratique des analyses de laboratoire de la thrombophilie chez l’adulte et l’enfant, validée par les membres du GFHT. Après une mise au point sur les conditions pré-analytiques, une analyse des caractéristiques des méthodes d’études des inhibiteurs physiologiques de la coagulation est présentée et des algorithmes de conduite diagnostique sont proposés. Les causes d’anomalies acquises et d’interférences sont détaillées. En première intention, l’activité cofacteur de l’héparine de l’antithrombine et l’activité de la protéine C seront mesurées ainsi que l’activité de la protéine S ou sa mesure par méthode immunologique (mesure de l’antigène). La place de l’étude des gènes de l’antithrombine et des protéines C et S est discutée. Des propositions sont émises pour la mesure des inhibiteurs quand un traitement anticoagulant est en cours, notamment AOD. Le FV Leiden et le variant G20210A (c.*97G>A) du gène F2 peuvent être recherchés par différentes méthodes, commerciales ou « maison », et un résultat positif sera confirmé avec un nouveau prélèvement. Il est recommandé de ne pas rechercher une résistance à la protéine C activée pour détecter un facteur V Leiden. La recherche d’anomalies constitutionnelles du fibrinogène est parfois indiquée, et les méthodes à utiliser sont discutées. Concernant la thrombophilie acquise, les tests nécessaires au diagnostic du syndrome des anticorps antiphospholipides sont présentés. La démarche diagnostique d’un anticoagulant circulant de type lupique chez un patient traité par anticoagulant et notamment par AOD, est décrite. La mesure des D-dimères n’est proposée que pour participer à l’évaluation du risque de récidive de thrombose veineuse. Le texte aborde enfin des questions pratiques essentielles, relatives au moment optimal du prélèvement pour les analyses de laboratoire de la thrombophilie.